AF350標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V，是細(xì)胞凋亡研究的金標(biāo)準(zhǔn)工具，通過特異性結(jié)合外翻PS，高靈敏度檢測(cè)早期凋亡細(xì)胞。其非放射性、快速簡便的特性，使其成為免疫細(xì)胞凋亡途徑分析的理想選擇，廣泛應(yīng)用于炎癥和自身免疫疾病研究。

詳細(xì)介紹

【??參數(shù)信息】（AF350標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V）

英文名稱：Annexin V, Alexa Fluor 350 conjugate；AF350-Annexin V Conjugate；AF350 Annexin V

中文名稱：Alexa Fluor 350標(biāo)記的膜聯(lián)蛋白V；AF350-Annexin V 標(biāo)記物

Ex (nm)：343

Em (nm)：441

分子量：~36000

溶劑：Water

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡單概述】（AF350標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V）

膜聯(lián)蛋白（Annexins）是一類鈣離子依賴性磷脂膜結(jié)合蛋白家族。

其中，膜聯(lián)蛋白V（Annexin V）作為細(xì)胞凋亡研究的關(guān)鍵工具，能夠特異性檢測(cè)細(xì)胞表面暴露的磷脂酰絲an酸（PS）——這一特征不僅是細(xì)胞凋亡的標(biāo)志，也存在于其他形式的細(xì)胞死亡過程中。

在細(xì)胞凋亡過程中，磷脂酰絲an酸會(huì)從細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)至外側(cè)。這種細(xì)胞表面PS的暴露是凋亡早期/中期的普遍指征，其可檢測(cè)時(shí)間早于細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化的發(fā)生。

目前，細(xì)胞活性的監(jiān)測(cè)可通過多種參數(shù)實(shí)現(xiàn)，而基于膜聯(lián)蛋白V-熒光染料偶聯(lián)物（Annexin V-dye conjugates）的PS外翻檢測(cè)法已成為凋亡監(jiān)測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。

XFD350標(biāo)記的膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物與Alexa Fluor 350-Annexin V具有相同的分子結(jié)構(gòu)，是目前的熒光標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V探針之一，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凋亡監(jiān)測(cè)。

優(yōu)勢(shì)

高靈敏度與特異性：通過結(jié)合外翻的PS，高效檢測(cè)早期凋亡細(xì)胞。

非放射性檢測(cè)：提供安全、簡便的凋亡檢測(cè)方法，無需放射性物質(zhì)。

快速簡便的操作流程：染色與分析步驟簡單，實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間短。

廣泛的應(yīng)用范圍：適用于多種細(xì)胞類型及實(shí)驗(yàn)條件。

【AF350 Annexin V是如何分析免疫細(xì)胞在炎癥或自身免疫疾病中的凋亡途徑的？】

（一）檢測(cè)原理

PS外翻：

正常細(xì)胞中PS分布于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)；凋亡早期，PS外翻至膜表面。AF350標(biāo)記的Annexin V在鈣離子存在下與PS高親和力結(jié)合，發(fā)射藍(lán)色熒光（激發(fā)/發(fā)射波長約346/442 nm）。

區(qū)分凋亡階段：

常與膜不透性染料聯(lián)用：

早期凋亡：Annexin V?/PI?

晚期凋亡/壞死：Annexin V?/PI?

活細(xì)胞：Annexin V?/PI? 。

（二）實(shí)驗(yàn)步驟（以流式細(xì)胞術(shù)為例）

細(xì)胞制備：

分離病變組織或外周血中的免疫細(xì)胞，用預(yù)冷PBS洗滌后重懸于含Ca2?的結(jié)合緩沖液。

染色孵育：

加入AF350 Annexin V和PI，避光室溫孵育15分鐘。

流式檢測(cè)：

使用流式細(xì)胞儀，AF350熒光通過紫外或紫色激光通道檢測(cè)，PI通過FL2或FL3通道檢測(cè)。

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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn)，敬請(qǐng)知悉。

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AF350標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V