【??參數(shù)信息】(AF350標記膜聯(lián)蛋白V)
英文名稱:Annexin V, Alexa Fluor 350 conjugate;AF350-Annexin V Conjugate;AF350 Annexin V
中文名稱:Alexa Fluor 350標記的膜聯(lián)蛋白V;AF350-Annexin V 標記物
【簡單概述】(AF350標記膜聯(lián)蛋白V)
膜聯(lián)蛋白(Annexins)是一類鈣離子依賴性磷脂膜結合蛋白家族。
其中,膜聯(lián)蛋白V(Annexin V)作為細胞凋亡研究的關鍵工具,能夠特異性檢測細胞表面暴露的磷脂酰絲an酸(PS)——這一特征不僅是細胞凋亡的標志,也存在于其他形式的細胞死亡過程中。
在細胞凋亡過程中,磷脂酰絲an酸會從細胞膜內側翻轉至外側。這種細胞表面PS的暴露是凋亡早期/中期的普遍指征,其可檢測時間早于細胞形態(tài)學變化的發(fā)生。
目前,細胞活性的監(jiān)測可通過多種參數(shù)實現(xiàn),而基于膜聯(lián)蛋白V-熒光染料偶聯(lián)物(Annexin V-dye conjugates)的PS外翻檢測法已成為凋亡監(jiān)測的金標準。
XFD350標記的膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物與Alexa Fluor 350-Annexin V具有相同的分子結構,是目前的熒光標記膜聯(lián)蛋白V探針之一,廣泛應用于細胞凋亡監(jiān)測。
高靈敏度與特異性:通過結合外翻的PS,高效檢測早期凋亡細胞。
非放射性檢測:提供安全、簡便的凋亡檢測方法,無需放射性物質。
快速簡便的操作流程:染色與分析步驟簡單,實驗操作時間短。
【AF350 Annexin V是如何分析免疫細胞在炎癥或自身免疫疾病中的凋亡途徑的?】
正常細胞中PS分布于細胞膜內側;凋亡早期,PS外翻至膜表面。AF350標記的Annexin V在鈣離子存在下與PS高親和力結合,發(fā)射藍色熒光(激發(fā)/發(fā)射波長約346/442 nm)。
分離病變組織或外周血中的免疫細胞,用預冷PBS洗滌后重懸于含Ca2?的結合緩沖液。
加入AF350 Annexin V和PI,避光室溫孵育15分鐘。
使用流式細胞儀,AF350熒光通過紫外或紫色激光通道檢測,PI通過FL2或FL3通道檢測。
【相關試劑】
ReadiCleave XFD647 AML-NHS 酯
PerCP-iFluor 700 PerCP-iFluor 700 串聯(lián)染料
ATTO 488 acid ATTO 488酸 1443553-08-9
APC-XFD700 Tandem APC-XFD 700 串聯(lián)染料
APC-iFluor 720 Tandem APC-iFluor 720 串聯(lián)染料