俄勒岡綠488 BAPTA ，是一種高效細(xì)胞滲透性鈣離子熒光探針，激發(fā)波長(zhǎng)494 nm，發(fā)射波長(zhǎng)523 nm，鈣結(jié)合后熒光強(qiáng)度提升14倍，廣泛應(yīng)用于活細(xì)胞鈣成像、高通量篩選及多色協(xié)同標(biāo)記研究。

詳細(xì)介紹

【參數(shù)信息】

英文名稱：OregonGreen488 BAPTA；OG 488 BAPTA

中文名稱：俄勒岡綠488 BAPTA ；OG488 BAPTA鈣離子探針

激發(fā)波長(zhǎng)：494 nm

發(fā)射波長(zhǎng)：523 nm

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡(jiǎn)單概述】（俄勒岡綠488 BAPTA ）

Oregon Green 488 BAPTA is a cell-permeant, fluorogenic Ca2+ indicator used in flow cytometry and fluorescence microscopy. It exhibits a 14-fold intensity increase when bound to calcium. It has an excitation peak at 494 nm and an emission peak at 523 nm.

Oregon Green 488 BAPTA 是一種細(xì)胞滲透性熒光 Ca2+ 指示劑，用于流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡。當(dāng)與鈣結(jié)合時(shí)，它的強(qiáng)度增加了 14 倍。它的激發(fā)峰位于 494 nm，發(fā)射峰位于 523 nm。

具體特性如下：

光譜特性：激發(fā)波長(zhǎng)約 494 nm，大發(fā)射波長(zhǎng)約 523nm，與 488 nm 氬離子激光線高度匹配，適用于共聚焦顯微鏡及流式細(xì)胞術(shù)。

鈣親和性：其衍生物（如 BAPTA-1、BAPTA-6F）的鈣解離常數(shù)（Kd）范圍在 0.1–3 μM，覆蓋從高親和力（適用于靜息鈣水平）到低親和力（適用于高鈣瞬變）的檢測(cè)需求。

pH 穩(wěn)定性：由于 Oregon Green 488 的 pKa 約為 4.6–4.8，其在生理 pH 范圍內(nèi)熒光信號(hào)受氫離子影響較小，但可用于酸性細(xì)胞器（如溶酶體）的 pH 監(jiān)測(cè)。

作用機(jī)制

其作用機(jī)制基于鈣離子與 BAPTA 螯合基團(tuán)的結(jié)合引起熒光團(tuán)構(gòu)象變化，進(jìn)而改變熒光強(qiáng)度：

鈣結(jié)合與熒光響應(yīng)：當(dāng) Ca2? 與 BAPTA 的羧基和氨基基團(tuán)結(jié)合時(shí)，分子內(nèi)電子轉(zhuǎn)移效應(yīng)導(dǎo)致 Oregon Green 488 熒光團(tuán)的熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)（可達(dá) 100 倍）。

細(xì)胞加載方式：

細(xì)胞滲透性 AM 酯（如 Oregon Green 488 BAPTA-1 AM）：可穿透細(xì)胞膜，被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解后釋放活性指示劑，滯留于胞質(zhì)內(nèi)。

不可滲透性鹽形式（如六鉀鹽）：需通過顯微注射或電穿孔導(dǎo)入細(xì)胞，適用于特定細(xì)胞類型或避免酯酶干擾的實(shí)驗(yàn)。

信號(hào)檢測(cè)與校準(zhǔn)：熒光強(qiáng)度變化與鈣濃度呈正相關(guān)，可通過比率法（與鈣不敏感染料聯(lián)用）或單波長(zhǎng)法量化鈣瞬變，例如在肌肉收縮、神經(jīng)遞質(zhì)釋放等過程中監(jiān)測(cè)鈣信號(hào)。

【應(yīng)用領(lǐng)域】

（一）活細(xì)胞鈣成像：

實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)胞質(zhì)鈣瞬變（如神經(jīng)元電活動(dòng)、胰島細(xì)胞鈣信號(hào)、免疫細(xì)胞激活），尤其適用于檢測(cè)快速、小幅度的鈣變化（如動(dòng)作電位誘發(fā)的鈣瞬變）。

（二）高通量篩選與流式細(xì)胞術(shù)：

用于藥物篩選（如鈣通道調(diào)節(jié)劑）、細(xì)胞凋亡或代謝研究，通過微孔板讀數(shù)儀或流式細(xì)胞儀量化鈣響應(yīng)。

（三）組織與病理模型研究：

在厚組織切片（如胰腺組織、腦切片）中追蹤鈣信號(hào)，研究疾病機(jī)制（如糖尿病、神經(jīng)退行性疾?。?/span>

（四）多色成像與協(xié)同標(biāo)記：

與其他熒光探針（如量子標(biāo)記、紅色熒光染料）共用，實(shí)現(xiàn)多參數(shù)檢測(cè)（如鈣與 pH 或膜電位同步成像）。

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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn)，敬請(qǐng)知悉。

關(guān)鍵詞：熒光顯微鏡顯微鏡

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俄勒岡綠488 BAPTA