【參數(shù)信息】(iFluor 488小麥胚芽凝集素探針)
英文名稱:iFluor 488-Wheat Germ Agglutinin (WGA) Conjugate
中文名稱:iFluor 488小麥胚芽凝集素(WGA探針)
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡(jiǎn)單概述】(iFluor 488小麥胚芽凝集素探針)
The iFluor 488 Wheat Germ Agglutinin (WGA) Probe is a composite biomarker tool that covalently conjugates the high-brightness iFluor 488 fluorescent dye with plant-derived WGA agglutinins.
This probe enables specific fluorescence imaging and analysis of glycoprotein complexes on cell membrane surfaces.
With excitation/emission wavelengths of approximately 491 nm and 516 nm, it features high quantum yield and excellent photostability, making it suitable for long-term observation in live cells, fixed cells, and tissue sections.
iFluor 488 小麥胚芽凝集素(WGA)探針是一種將高亮度iFluor 488熒光染料與植物來(lái)源凝集素WGA共價(jià)偶聯(lián)的復(fù)合型生物標(biāo)記工具。
用于細(xì)胞膜表面糖綴合物的特異性熒光成像和分析。
該探針具有激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)約491 nm/516 nm,量子產(chǎn)率高、光穩(wěn)定性強(qiáng),適合活細(xì)胞、固定細(xì)胞及組織切片的長(zhǎng)時(shí)程觀察。
【實(shí)驗(yàn)步驟】
總體流程:清洗→染色→孵育→洗滌→成像;全程避光。
樣本準(zhǔn)備:將貼壁/懸浮細(xì)胞用HHBS輕洗兩遍,保持細(xì)胞貼壁良好或懸浮狀態(tài),棄去廢液。
染色孵育:加入100 µL(96孔板)或覆蓋體積的iFluor 488-WGA工作液(5–10 µg/mL,37 °C避光孵育10–30 min;活細(xì)胞通常20 min即可,固定細(xì)胞可延長(zhǎng)至30 min)。
洗滌:HHBS輕洗兩次,及時(shí)移除未結(jié)合探針。
核染色(可選):根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要孵育Hoechst 33342(1–2 µg/mL,5 min)并用HHBS洗兩次。
成像:在熒光顯微鏡或激光共聚焦下使用FITC濾鏡組(Ex/Em \~488/510–530 nm)捕獲圖像;DAPI通道同時(shí)記錄核染色信號(hào)。
濃度與時(shí)間需針對(duì)細(xì)胞類型預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,避免過(guò)度染色引發(fā)非特異胞內(nèi)信號(hào)。
固定細(xì)胞染色時(shí)不建議進(jìn)行Triton-X等通透,以防WGA進(jìn)入胞內(nèi)標(biāo)記高爾基/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。
防止熒光光漂白,操作過(guò)程中盡短光照與使用抗淬滅劑。
每批次探針使用前短暫離心可減少沉淀帶來(lái)的背景。
【相關(guān)試劑】
Annexin V-iFluor 633標(biāo)記
Annexin V-iFluor 350標(biāo)記
Annexin V-iFluor 488標(biāo)記
Annexin V-iFluor 555標(biāo)記
Annexin V-iFluor 594標(biāo)記
ReadiUse 預(yù)活化 PerCP 馬來(lái)酰亞胺
ATTO 647 acid ATTO 647酸 823803-95-8
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