標(biāo)題:Annexin V-iFluor 488標(biāo)記
【參數(shù)信息】
英文名稱:Annexin V-iFluor 488標(biāo)記;Annexin V-iFluor 488 conjugate
中文名稱:膜聯(lián)蛋白V-iFluor 488標(biāo)記;膜聯(lián)蛋白V-iFluor 488 共軛物
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡單概述】(膜聯(lián)蛋白V-iFluor 488 共軛物)
膜聯(lián)蛋白(Annexins)是一類依賴鈣離子與磷脂膜結(jié)合的蛋白質(zhì)家族。
作為細(xì)胞凋亡研究的核心工具,膜聯(lián)蛋白V(Annexin V)能特異性探知細(xì)胞表面暴露的PS——這一特征不僅是凋亡標(biāo)志,也存在于其他細(xì)胞死亡形式中。
細(xì)胞活性的評(píng)估指標(biāo)多樣,其中膜聯(lián)蛋白V-熒光偶聯(lián)物通過檢測(cè)PS外翻現(xiàn)象,成為凋亡監(jiān)測(cè)的黃金標(biāo)準(zhǔn)。
在凋亡進(jìn)程中,PS會(huì)從細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)向外側(cè),這種表面PS的暴露作為凋亡早中期的普適性指標(biāo),其檢出時(shí)間點(diǎn)甚至早于細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。
Annexin V-iFluor 488標(biāo)記的光譜特性與Alexa Fluor 488相似。
高靈敏度與特異性:通過結(jié)合外翻的PS,高效檢測(cè)早期凋亡細(xì)胞。
非放射性檢測(cè):提供安全、簡便的凋亡檢測(cè)方法,無需放射性物質(zhì)。
快速簡便的操作流程:染色與分析步驟簡單,實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間短。
廣泛的應(yīng)用范圍:適用于多種細(xì)胞類型及實(shí)驗(yàn)條件。
【處理貼壁細(xì)胞有需要注意什么?】
對(duì)于貼壁細(xì)胞,消化是一個(gè)關(guān)鍵步驟。
1. 貼壁細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡時(shí)如有漂浮細(xì)胞,需收集漂浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞后合并染色。
2. 處理貼壁細(xì)胞時(shí)要小心操作,盡量避免人為的損傷。
3. yi酶消化時(shí)間過短,細(xì)胞需要用力吹打才能脫落,容易造成細(xì)胞膜的損傷;以 HY-K1073 為例,PI 攝入過多,消化時(shí)間過長,細(xì)胞膜同樣易造成損傷,甚至?xí)绊懠?xì)胞膜上PS與 Annexin V FITC 的結(jié)合。
消化時(shí)將yi酶鋪滿孔板底后,輕搖使yi酶與細(xì)胞充分接觸,然后倒掉大部分yi酶,利用剩余少量yi酶再消化一段時(shí)間,待細(xì)胞間空隙增大,瓶底呈花斑狀即可終止。
4.在消化液中盡量不用 EDTA,EDTA 會(huì)影響 Annexin V 與 PS 的結(jié)合。
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