試劑中英文名稱:OrigamiB(DE3) Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
儲(chǔ)存:-20℃干燥避光保存至少1年,冰袋運(yùn)輸。
規(guī)格:10×100μl,50×100μl
一、Description:(OrigamiB(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞)
The Origami B host strain carries the same mutations as the original Origami strain in trxB and gor, but they originate from the BL21 lacZY mutant.
The expression levels can be precisely controlled by adjusting IPTG concentration.
Thus, Origami B integrates the ideal characteristics of BL21, Tuner, and Origami strains within a single bacterial background.
The mutations in trxB and gor are selectable under kanamycin and tetracycline respectively, meaning these strains cannot be used with plasmids that require either kanamycin or tetracycline for selection.
Additionally, these strains contain BL21's lon and ompt deficiencies, which enhance protein stability.
DE3 indicates that the host is a λDE3-competent lysogen, thus carrying chromosomal copies of the T7 RNA polymerase gene under the control of the lacUV5 promoter.
This strain is suitable for inducing protein production by expressing the target gene cloned in the pET vector using IPTG.
Origami B宿主菌株在trxB和gor中攜帶與原始Origami菌株相同的突變,只是它們來(lái)自BL21的lacZY突變體,可以通過(guò)調(diào)節(jié)IPTG的濃度來(lái)控制表達(dá)水平。
因此Origami B菌株在一個(gè)菌株背景中結(jié)合了BL21、Tuner和Origami菌株的理想特征。
trxB和gor的突變分別在Kan和四環(huán)素上是可選擇的;因此,這些菌株不能與只能用Kan或四環(huán)素選擇的質(zhì)粒一起使用。
這些菌株還包括BL21的lon和ompT缺陷,可增加蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。
DE3表明宿主是λDE3的溶原菌,因此在lacUV5啟動(dòng)子的控制下攜帶T7 RNA聚合酶基因的染色體拷貝。
這樣的菌株適用于通過(guò)用IPTG誘導(dǎo)從克隆在pET載體中的靶基因生產(chǎn)蛋白質(zhì)。
二、使用場(chǎng)景:(OrigamiB(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞)
DNA化學(xué)轉(zhuǎn)化:用于外源質(zhì)粒DNA(如pET、pGEX、pMAL系列載體)的熱擊轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)10?–10? cfu/μg DNA(以pUC19為對(duì)照質(zhì)粒)。
特別適用于表達(dá)含二硫鍵的難溶性蛋白,因其基因型包含突變的硫氧還蛋白還原酶(trxB)和gu胱甘肽還原酶(gor),可促進(jìn)二硫鍵正確折疊,提高蛋白可溶性。
整合λ噬菌體DE3溶原體,表達(dá)T7 RNA聚合酶,需配合IPTG誘導(dǎo)(適用于T7啟動(dòng)子載體,如pET系列)。
菌株天然具有KanR和四環(huán)素(TetR)抗性,因此不能用于攜帶這兩種抗性的質(zhì)粒表達(dá)(如pUC19對(duì)照實(shí)驗(yàn)需避開(kāi)KanR/TetR抗性質(zhì)粒)。
適用于AmpR等非Kan/Tet抗性的質(zhì)粒。
用于科研相關(guān)領(lǐng)域,不能用于人體實(shí)驗(yàn)!
西安強(qiáng)化生物提供的相關(guān)系列:
EPI400 Electrocompetent cell
Cy7NS acid Cy7NS 酸(Cy7-COOH)
Hoechst 33258 Stain, Ready-to use即用型染色液
Hoechst 33342 Stain, Ready-to use即用型染色液
Cyanine 3 monoacid [equivalent to Cy3 acid] Cy3,酸
Cyanine 5 monoacid [equivalent to Cy5 acid] Cy5,酸
Cyanine 7 monoacid [equivalent to Cy7 acid] Cy7,酸