試劑英文名稱:PEI 25K Transfection Reagent
儲存:-20℃干燥避光保存至少1年,低溫運(yùn)輸。
一、背景描述:(PEI 25K轉(zhuǎn)染試劑)
PEI 25K is a powerful, trusted, and cost-effective transient transfection reagent. In HEK293 and CHO expression systems, PEI offers consistently high gene expression on a wide scale (96 well plates up to 100 L bioreactors). Each year, more researchers and companies turn to Polysciences PEI to gain a critical edge in their work. Relative to most other options, using PEI to prepare transfection reagents in-house can offer as much as a 40% reduction in total transfection costs.
1、適用于生產(chǎn) mABs、rAbs、bsABs和病毒載體(AVV、LV、BEV);
2、在HEK293、CHO 和 Sf9 細(xì)胞系中高度有效;
3、適用于從研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的各個階段;
4、可預(yù)測,可大規(guī)模生產(chǎn);
5、兩周內(nèi)即可生成大量目標(biāo)蛋白或病毒;
應(yīng)用前景:當(dāng)前與未來方向(PEI 25K轉(zhuǎn)染試劑)
PEI 25K的應(yīng)用前景廣闊,在工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)和生物醫(yī)藥領(lǐng)域,強(qiáng)調(diào)其成本效益和可擴(kuò)展性,但也需注意升級替代品的趨勢。
(1)工業(yè)規(guī)模生產(chǎn):PEI 25K在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中表現(xiàn)突出,支持從微孔板(96孔)到大型生物反應(yīng)器(100L)的連續(xù)高基因表達(dá)。
(2)成本效益:內(nèi)部制備PEI 25K轉(zhuǎn)染試劑可比商業(yè)試劑降低總成本40%和,這得益于其原材料廉價和高效性。
基因治療與疫苗開發(fā):和顯示,PEI 25K在體內(nèi)外基因轉(zhuǎn)染中高效,是基因治療載體設(shè)計的核心。未來可結(jié)合靶向修飾提升特異性。
重組蛋白生產(chǎn):適用于瞬時轉(zhuǎn)染,快速獲得高滴度蛋白,引用文獻(xiàn)支持其在HEK293細(xì)胞中的高產(chǎn)應(yīng)用。
細(xì)胞系兼容性:除HEK293和CHO外,還適用于Sf9、HepG2等細(xì)胞,與含血清培養(yǎng)基兼容,減少實驗干擾。
PEI 25000、Milli-Q 水/注射用水(WFI)或類似的生物級水、12 mol/L鹽酸(HCl)、10 mol/LNaOH、一次性0.1~0.2 μm PES 真空無菌過濾器、無菌HDPE或聚丙烯儲存瓶。
1)于1 L玻璃燒杯,將1g PEI 25000粉末加入900 mL Milli-Q超純水或其他相當(dāng)級別的生物用水中,在磁子攪拌器上攪拌均勻,產(chǎn)生小渦。
2)邊攪拌邊滴加入鹽酸(12 mol/L)調(diào)節(jié)pH,直至pH<2.0。
3)蓋上燒杯頂部并攪拌3小時至溶解;整個過程要保持pH<2.0。
【注】:可能會存在一些小纖維狀顆粒不能溶解,這是正常現(xiàn)象。
4)邊攪拌邊滴加入NaOH(10 mol/L)調(diào)節(jié)pH,直至到6.9 ~7.1。
5)將溶液轉(zhuǎn)入量筒內(nèi),并加水定容到1 L。
6)用一次性0.1~0.2 µm PES真空過濾器過濾除菌,即得到1 mg/mL的儲存液。
7)根據(jù)需要分裝并儲存在-20 °C ,半年穩(wěn)定。
【注】:儲存液再次融化后,可置于4 °C 保存,2周穩(wěn)定,但絕不可重新凍存。
用于科研相關(guān)領(lǐng)域,不能用于人體實驗!
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