試劑中英文名稱：BY4741 Chemically Competent Cell 酵母菌化學感受態(tài)細胞
一、背景描述：（BY4741 酵母菌化學感受態(tài)細胞）
BY4741 strain is derived from the original strain of Saccharomyces cerevisiae, S288C, which is a commonly usedstrain in the laboratory and is a gamete MATa type, which is widely used Sodium and potassium ion balance; Cells resist salts: absorption of various metal ions: heavy metal toxicity: Various sugars, carbon sources for eukaryotic cell growth influence: Peroxide, superoxide absorption and transport in the study.
BY4741 Saccharomyces cerevisiae is a compound of histidine, leucine, methionine,Uracil-deficient strain that transforms pYES2 plasmids directly into BY4741 cells via PEG/LiAc.
Screening of plasmid pYES2 The flag is URA, which can be filtered using the SD-URA tablet.
BY4741 comDetent cells are speciallv pYES2 plasmid detection conversion efficiency > 10 cfu/Ug DNA.
BY4741 菌株來源于釀酒酵母原始菌株——S288C，是實驗室的常用菌株，為配子MATa 型，廣泛應用于鈉，鉀離子平衡；細胞抗鹽；各種金屬離子的吸收；重金屬毒性；各種糖類，碳源對真核生物細胞生長的影響；過氧化物，超氧化物的吸收與運輸?shù)难芯恐小?/span>
BY4741釀酒酵母為組an酸、亮an酸、甲硫an酸 、尿mi啶缺陷型菌株，可直接通過 PEG/LiAc將pYES2質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進入BY4741細胞內(nèi)。
質(zhì)粒pYES2的篩選標志為URA，可用SD-URA平板進行篩選。
BY4741感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，-80℃可保存六個月，pYES2 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>103 cfu/μg DNA。
應用前景（BY4741 酵母菌化學感受態(tài)細胞）
通過基因敲除（如YCF1基因突變株△ycf1）研究重金屬解毒機制。
用于啟動子活性分析、信號通路驗證等分子生物學實驗。
適用于酵母單雜交（Y1H）、雙雜交（Y2H）系統(tǒng)，檢測蛋白-DNA或蛋白-蛋白相互作用。
研究酵母在脅迫環(huán)境（高鹽、重金屬）下的適應性，為工業(yè)菌株改良提供依據(jù)。
探索糖代謝機制，助力生物燃料或食品工業(yè)開發(fā)。
冰上融化感受態(tài)細胞（100μl），避免反復凍融。
載體DNA（Carrier DNA）需96℃變性3分鐘，冰浴驟冷，重復一次以消除二級結(jié)構(gòu)。
依次加入：1–3 μg目標質(zhì)粒、10 μl變性載體DNA、500 μl PEG/LiAc溶液，輕柔混勻。
30℃水浴30分鐘（每15分鐘翻轉(zhuǎn)混勻）→ 42℃水浴15分鐘（每7.5分鐘翻轉(zhuǎn)）。
5000 rpm離心40秒，棄上清，用ddH?O重懸洗滌一次。
終重懸于50 μl ddH?O，涂布于SD-URA平板，29℃培養(yǎng)48–96小時。
溫度敏感：酵母在＞30℃時生長受抑制，操作需嚴格控制溫度。
培養(yǎng)基差異：不同營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基（如SD-LEU vs. SD-URA）中菌落生長速度可能不同，需調(diào)整培養(yǎng)時間。
質(zhì)粒濃度：高純度質(zhì)粒可提升轉(zhuǎn)化效率，避免使用毒性基因。
用于科研相關(guān)領(lǐng)域，不能用于人體實驗！
Lewis-X (Lex) Trisaccharide
BAPTA，Tetrapotassium Salt
iFluor 647 alkyne iFluor 647炔烴
ReadiLink mFluor 700抗體標記試劑盒
iFluor 555 maleimide iFluor 555馬來酰亞胺
iFluor 680 maleimide iFluor 680馬來酰亞胺
SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)
EPI400 Electrocompetent cell 大腸桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞
DH10B Electrocompetent cell 大腸桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞
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