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西安強化生物科技有限公司


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Annexin V-EGFP/PI 細胞凋亡檢測試劑盒

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參  考  價:￥500 - ￥15000 /mg
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 產(chǎn)品型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    西安市

聯(lián)系方式：李杰查看聯(lián)系方式

更新時間：2025-08-29 08:38:35瀏覽次數(shù)：215次

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經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：496條

所在地區(qū)：陜西西安市

聯(lián)系人：李杰 （經(jīng)理）

產(chǎn)品簡介

Annexin V-EGFP/PI 細胞凋亡檢測試劑盒，通過熒光標記區(qū)分凋亡各階段：EGFP標記早期凋亡細胞膜外翻的PS，PI穿透晚期凋亡/壞死細胞核，雙染技術讓細胞狀態(tài)一目了然，配套優(yōu)化步驟確保1小時內完成高靈敏度檢測。

詳細介紹

【??參數(shù)信息】

英文名稱：Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit

中文名稱：Annexin V-EGFP/PI 細胞凋亡檢測試劑盒

規(guī)格：20T、50T、100T

運輸：低溫運輸。

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強化生物科技

【簡單概述】

Annexin V-EGFP/PI 細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit）是一款用來檢測細胞凋亡的試劑盒，可以用流式細胞儀或熒光顯微鏡進行檢測。

本試劑盒包含融合增強型綠色熒光蛋白（EGFP）的Annexin V，用來檢測早期細胞凋亡；以及碘化丙啶（PI），用來檢測壞死細胞。

本試劑盒的工作原理在于：Phosphotidylserine是一種帶負電荷的磷脂。

正常細胞中，PS位于細胞膜內面，但當?shù)蛲鲩_始后，PS在磷脂雙分子層中的不對稱分布逐漸消失并轉移到細胞膜表面，從而顯露在細胞外環(huán)境中。

膜聯(lián)蛋白V（Annexin V）是一種分子量約35kDa的鈣離子依賴性磷脂結合蛋白，能非常容易的結合PS，且具有高度的親和性。

因此，通過Annexin V與PS的結合與否來判斷凋亡發(fā)生。

另外，PI的引入能輔助區(qū)分凋亡早期細胞和晚期凋亡或壞死細胞。

PI作為一種活細胞排斥探針，不能穿透具有完整細胞膜的正常細胞或凋亡早期細胞，但能穿透喪失細胞膜完整性的凋亡晚期細胞或壞死細胞，從而將細胞核染紅。

因此，將Annexin V-EGFP與PI聯(lián)合使用時，呈現(xiàn)結果為：正常細胞，早期凋亡細胞；晚期凋亡細胞和壞死細胞同時呈現(xiàn)雙陽性。

【染色步驟】

（1）細胞樣品的準備：

a）對于貼壁細胞：

小心收集細胞培養(yǎng)液到一干凈離心管內備用。

用不含EDTA的yi酶消化細胞至細胞可以被輕輕用移液管或槍頭吹打下來時，加入前面收集的細胞培養(yǎng)液，吹打下所有的貼壁細胞，并輕輕吹散細胞。

再次收集到離心管內。1000rpm離心5min，沉淀細胞。

對于特定的細胞，如果無法離心至管底，可以適當延長離心時間或稍稍加大離心速度。

小心吸除上清，可以殘留約50µl左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細胞。

加入1ml 4℃預冷的PBS，重懸細胞，再次離心沉淀細胞，小心吸除上清。

b）對于懸浮細胞：

1000rpm離心5min沉淀細胞。

對于特定的細胞，如果無法離心至管底，可以適當延長離心時間或稍稍加大離心速度。

小心吸除上清，可以殘留約50µl左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細胞。

加入1ml 4℃預冷的PBS，重懸細胞，再次離心沉淀細胞，小心吸除上清。

（2）用去離子水按照1:3稀釋結合緩沖液到1×，比如，5ml結合緩沖液（4×）加入15ml去離子水。

（3）用結合緩沖液（1×）重新懸浮細胞并調整濃度為1-5×106/ml。

（4）取100µl的細胞懸液到5ml流式管中，加入5µl Annexin V-EGFP混勻，室溫避光孵育5min。

（5）再加入10µl碘化丙啶溶液，并加400µl結合緩沖液（1×），混勻，盡快（＜1h）用流式細胞儀或熒光顯微鏡完成檢測。

【注意】：

方便起見，步驟1.4內可同時加入5µl Annexin V-EGFP和10µl碘化丙啶溶液混勻，室溫避光孵育5min。

然后加入400µl結合緩沖液（1×）混勻，但需盡快（＜1h）用流式細胞儀或熒光顯微鏡完成檢測。

但為了減少實驗誤差，建議按照1.4-1.5的步驟來操作。

因PI受時間影響比較大，細胞標記上PI后毒性會增加。

隨著時間延長會導致PI染色增加，尤其是檢測早期凋亡時，誤差會明顯加大。

建議PI加入后立即開始檢測。

【相關試劑】

MPP+ iodide

RIPA Lysis Buffer (Strong)RIPA

RIPA Lysis Buffer(Medium)RIPA

iFluor 700 amine iFluor 700 胺

BAPTA,Tetrasodium Salt鈣螯合劑

BAPTA,Tetrapotassium Salt鈣螯合劑

EGTA AM,CalciumChelator鈣螯合劑

Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit

Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit

Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit

Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit

Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell

Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell

以上資料由西安強化生物科技有限公司xxn整理！

本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。





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