【??參數(shù)信息】
英文名稱:JM109(DE3) Chemically Competent Cell
中文名稱:JM109(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
為冷凍的細(xì)胞懸液,呈半透明或乳白色液體狀。
轉(zhuǎn)化效率:≥10? cfu/μg DNA(以pUC19檢測)
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡單概述】
JM109(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是一種基因工程改造的大腸桿菌(E. coli)菌株,通過化學(xué)方法處理使其處于"感受態(tài)"(competent)狀態(tài),便于外源DNA的高效導(dǎo)入。其核心特征包括:
來源于JM109菌株,但染色體上整合了λ噬菌體的 DE3區(qū)。
recA1:減少同源重組,提高插入DNA穩(wěn)定性。
endA1:消除核酸內(nèi)切酶活性,提升質(zhì)粒DNA純度。
hsdR17:喪失限制系統(tǒng),避免外源DNA降解。
【注意事項】
感受態(tài)細(xì)胞必須用干冰運輸,感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在-80℃保存。
感受態(tài)細(xì)胞在冰上融化,不可在冰上放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時,需在相應(yīng)溫度及無菌條件下進(jìn)行。
為防止轉(zhuǎn)化實驗不成功,可保留部分連接反應(yīng)液以重新轉(zhuǎn)化,將損失降低。
產(chǎn)品包裝內(nèi)含質(zhì)粒pUC19 DNA(10pg/μl),供對照實驗用。
轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少最終用于涂板的菌量。
誘導(dǎo)時,IPTG濃度范圍可選:0.1~2mM。
為了得到足量的蛋白,需就合適誘導(dǎo)時間、溫度、IPTG濃度進(jìn)行優(yōu)化。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
【相關(guān)試劑】
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