【??參數(shù)信息】
英文名稱:EMSA PAGE Gel Preparation Kit
凝膠厚度:常規(guī)厚度為0.75mm、1mm或1.5mm。
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡單概述】
EMSA PAGE凝膠配制試劑盒,EMSA PAGE凝膠配制試劑盒提供了一套完整的試劑,用于快速、便捷地制備非變性聚丙烯酰胺凝膠(PAGE),以支持EMSA實(shí)驗(yàn)。
丙烯酰胺/雙丙烯酰胺(Acr/Bis) :作為凝膠基質(zhì),形成凝膠網(wǎng)絡(luò)以分離蛋白質(zhì)-核酸復(fù)合物。
凝膠緩沖液:維持凝膠電泳的pH環(huán)境,確保電泳條件穩(wěn)定。
過硫酸銨(APS) :作為凝膠聚合的引發(fā)劑,與雙丙烯酰胺反應(yīng)生成自由基,啟動(dòng)聚合反應(yīng)。
四甲基乙二胺(TEMED) :作為催化劑,加速APS的分解,促進(jìn)凝膠快速聚合。
【操作流程】
凝膠制備:將APS溶解于蒸餾水中制成10%溶液(-20℃保存),按配方混合各組分,加入TEMED后迅速灌注模具并靜置聚合(20-60分鐘)。
電泳:預(yù)電泳后,將樣品加入點(diǎn)樣孔,以100 V電壓電泳至溴酚藍(lán)到達(dá)凝膠下緣1/4處停止。
結(jié)果分析:通過凝膠染色或放射性檢測(cè),觀察遷移帶的位移,判斷蛋白質(zhì)與核酸的結(jié)合情況。
【應(yīng)用領(lǐng)域】
轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子/增強(qiáng)子的相互作用:驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄因子是否結(jié)合到特定DNA區(qū)域。
RNA結(jié)合蛋白研究:檢測(cè)RNA與蛋白質(zhì)的結(jié)合能力。
表觀遺傳學(xué)研究:分析組蛋白修飾或DNA甲基化對(duì)基因調(diào)控的影響。
(二)技術(shù)驗(yàn)證與聯(lián)合分析
與ChIP聯(lián)合使用:EMSA提供體外驗(yàn)證,ChIP提供體內(nèi)背景數(shù)據(jù),實(shí)現(xiàn)互補(bǔ)。
與其他技術(shù)的結(jié)合:EMSA作為高靈敏度的初步篩選工具,輔助后續(xù)大規(guī)模測(cè)序或質(zhì)譜分析。
【相關(guān)試劑】
Lucifer Yellow Cadaverine
Buccutite APC-Cy5.5抗體標(biāo)記試劑盒
PropidiumMonoazide(PMA)疊氮溴化丙錠
BMPO(Spin trapping reagent) 自旋捕獲劑
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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn),敬請(qǐng)知悉。