【??參數(shù)信息】
中英文名稱:Recombinant Lysyl Endopeptidase 重組賴氨酰內(nèi)切酶
級別:生化級(Biochemistry Grade)
合適溫度:30-37℃,50℃以上穩(wěn)定性下降
穩(wěn)定性:在 4mol/L 尿素或0.2%SDS 溶液中 30℃孵育 6h后,生物活性未發(fā)生降低。穩(wěn)定性較好。
細(xì)菌內(nèi)毒素:≤10EU/mg powder
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡單概述】
重組賴氨酰內(nèi)切酶屬于絲an酸蛋白酶,特異性切割賴an酸殘基羧基端的肽鍵。
Recombinant Lysyl Endopeptidase用于各種生物技術(shù)過程中,如:蛋白質(zhì)酶解生產(chǎn)多肽;GLP-1類藥物制備等。生物活性受 DFP、PMSF、TLCK 抑制,不被TACK抑制。
本品為大腸桿菌重組表達(dá)所得,無外源性的病毒污染,生產(chǎn)過程中不使用任何動物源的原料。
基于穩(wěn)定的重組生產(chǎn)工藝,可批量生產(chǎn),批次間幾乎無差異,質(zhì)量穩(wěn)定,且純度高,低內(nèi)毒素水平。
特異性識別位點(diǎn):專一性切割蛋白質(zhì)或多肽鏈中Lys殘基羧基端的肽鍵,對Arg殘基的切割能力極低。
活性中心:其活性位點(diǎn)包含 S1 袋,該結(jié)構(gòu)狹窄且細(xì)長,僅能容納線性側(cè)鏈的賴an酸殘基,而精an酸的胍基因空間位阻效應(yīng)無法進(jìn)入。
此外,活性位點(diǎn)的 Asp225 殘基與底物結(jié)合密切相關(guān)。
非特異性切割:部分研究指出其可能具有微量的非特異性切割能力,但整體特異性高于其他蛋白酶。
【應(yīng)用領(lǐng)域】
多肽與蛋白質(zhì)生產(chǎn):用于胰島素類似物和GLP-1類藥物的制備,通過酶切重組人前胰島素生成目標(biāo)肽段。
藥物質(zhì)量檢測:在抗體類藥物的生產(chǎn)中,用于磷酸化肽鑒定、二硫鍵分析和N-聚糖分析,確保藥物結(jié)構(gòu)一致性。
酶催化合成:用于Lys-X化合物的合成,如短肽YDDDDKRGWK的特異性酶切。
蛋白質(zhì)測序:在質(zhì)譜分析中,通過酶切蛋白質(zhì)生成肽段,輔助鑒定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和修飾位點(diǎn)。
復(fù)雜蛋白處理:在疏水性強(qiáng)或難溶性蛋白的酶切中,可通過添加變性劑(如尿素)或封閉二硫鍵提高效率。
(3)工業(yè)生產(chǎn)與質(zhì)量控制
高產(chǎn)量與穩(wěn)定性:通過大腸桿菌重組表達(dá)系統(tǒng),可實(shí)現(xiàn)連續(xù)批次生產(chǎn),單批次產(chǎn)量可達(dá)20g以上,且批間差異小。
配套技術(shù):提供固定化RLys-C,耐壓性能好,可循環(huán)回收使用,減少殘留風(fēng)險(xiǎn)。
【相關(guān)試劑】
Chlormequat Chloride(CCC)矮壯素
iFluor 620 succinimidyl ester iFluor 620琥珀酰亞胺酯
iFluor 570 succinimidyl ester iFluor 570 琥珀酰亞胺酯
Cyanine 3 monoacid [equivalent to Cy3 acid] Cy3,酸
Cyanine 5 monoacid [equivalent to Cy5 acid] Cy5,酸
Cyanine 3.5 acid [equivalent to Cy3.5 acid] Cy3.5 酸
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