【參數(shù)信息】
英文名稱:AFDye 488 Carboxylic Acid
(Alexa Fluor 488 Carboxylic Acid Equivalent)
同義名:AFDye 488 Acid; AFDye 488羧酸;
光譜相似染料:Alexa Fluor® 488, DyLight® 488, Fluorescein, Oregon Green
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡(jiǎn)單概述】
AFDye 488 Carboxylic Acid 是一種水溶性熒光染料,其化學(xué)結(jié)構(gòu)與 Alexa Fluor 488 Carboxylic Acid 等效。
它屬于磺化羅丹明衍生物家族,具有高亮度、強(qiáng)光穩(wěn)定性和pH不敏感性。
作為羧酸形式,其分子末端含自由羧基(-COOH),可通過活化后與生物分子的氨基、羥基等基團(tuán)共價(jià)結(jié)合,實(shí)現(xiàn)熒光標(biāo)記。
【作用機(jī)制】
作用機(jī)制:熒光產(chǎn)生與標(biāo)記化學(xué)
激發(fā)與發(fā)射:激發(fā)波長(zhǎng)(Ex)為 495 nm,發(fā)射波長(zhǎng)(Em)為 519 nm(綠色熒光),匹配488 nm氬離子激光器。
量子產(chǎn)率高達(dá)0.91-0.92;
消光系數(shù)達(dá)71,000-73,000 M?1cm?1,確保高信號(hào)強(qiáng)度;
抗光漂白能力強(qiáng),適用于長(zhǎng)時(shí)間顯微成像。
AFDye 488 Carboxylic Acid 需通過活化羧基生成活性中間體,才能與生物分子共價(jià)結(jié)合:
羧基(-COOH)在縮合劑作用下,與 N-羥基琥珀酰亞胺或衍生物反應(yīng),生成活性酯。
活性酯具有高反應(yīng)性,易與伯氨基(-NH2)形成穩(wěn)定的酰胺鍵。
需在弱堿性緩沖液中進(jìn)行,促進(jìn)氨基去質(zhì)子化;
低溫(4°C)避光操作以抑制副反應(yīng)和熒光淬滅。
直接應(yīng)用:在固相多肽合成中,可通過原位活化羧基修飾肽鏈。
【相關(guān)試劑】
Alexa Fluor 405-Streptavidin
Alexa Fluor 647-Streptavidin
BAPTA AM, Calcium Chelator
TOTO 3 Far-red Fluorescent Dye
TOTO 1 Green Fluorescent Dye
TO-PRO-1 Green Fluorescent Dye
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Alexa Fluor 555-Streptavidin
Alexa Fluor 594-Streptavidin
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ZnAF-2F DA,Cell Permeant鋅離子熒光探針
TAMRA alkyne,6-isomer,6-TAMRA-alkyne
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