【參數(shù)信息】
英文名稱(chēng):DH10B Electrocompetent cell大腸桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞
中文名稱(chēng):DH10B電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞
物理形態(tài):細(xì)胞為冷凍懸浮液,呈無(wú)色透明或微乳白色
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【核心優(yōu)勢(shì)】
DH10B Electrocompetent cell的核心優(yōu)勢(shì)
對(duì)標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒(如pUC19)效率達(dá) >101? cfu/μg DNA,適用于低豐度cDNA/gDNA
對(duì)大質(zhì)粒(10–150 kb)及BACs(細(xì)菌人工染色體)的克隆效率顯著高于常規(guī)菌株。
高效轉(zhuǎn)化甲基化/未甲基化DNA(真核/原核基因組均可)。
可處理復(fù)雜結(jié)構(gòu)(如含發(fā)夾的shRNA載體)。
(三)下游應(yīng)用優(yōu)勢(shì)
藍(lán)白斑篩選:lacZα標(biāo)記簡(jiǎn)化重組克隆鑒定。
高質(zhì)粒產(chǎn)量:endA1突變減少核酸污染,適配質(zhì)粒提取試劑盒。
穩(wěn)定性:recA1突變減少重組事件,保障大片段插入完整性。
【使用方法】
(所有操作均在無(wú)菌條件的標(biāo)準(zhǔn)下進(jìn)行)
【準(zhǔn)備工作】:根據(jù)每管(50μl)電擊感受態(tài)需10ml S.O.C.培養(yǎng)基的比例,提前將適量的S.O.C.培養(yǎng)基置于37℃預(yù)熱1-2h。
(1)將0.1 cm電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈吸水紙上5min,待其瀝干水分,正置5min,使乙醇充分揮發(fā)干凈,立即插入冰中,壓實(shí)冰面,電極杯頂離冰面0.5cm以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5min使其充分降溫。
(2)取-80℃保存的電擊感受態(tài)細(xì)胞插入冰中5min,待其融化。加入目的DNA,用手撥管底輕輕混勻,避免產(chǎn)生氣泡,立即插入冰中。
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