&使用方法
RH-237溶于DMSO配制成1mg/ml儲(chǔ)存液(~2mM),置于+4℃避光保存。
于實(shí)驗(yàn)當(dāng)天用Calcium-Tyrode's solution稀釋到工作濃度,DMSO殘留不超過(guò)0.4%。
k 光學(xué)標(biāo)測(cè)(Optical Mapping):
ZF心臟用10 μM blebbistatin 孵育至少60min以降低運(yùn)動(dòng)偽影。
成像前心臟用8 μM電位探針RH-237 室溫孵育15min。
英文名稱:RH237膜電位熒光探針
苯乙烯基染料RH237
儲(chǔ)存條件:-20℃避光干燥
苯乙烯基染料RH237 是一種快速反應(yīng)電位探針,主要用于神經(jīng)元的功能成像,還用于監(jiān)測(cè)細(xì)胞膜電位,突觸活動(dòng)和神經(jīng)元離子通道活性。
苯乙烯基染料通常的吸收或激發(fā)光譜藍(lán)移為20 nm,發(fā)射光譜藍(lán)移為80 nm。
&注意事項(xiàng)
建議初始濃度 1–5 μM,但需根據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整:
神經(jīng)元:2–3 μM(過(guò)高濃度易導(dǎo)致背景熒光);
心肌細(xì)胞/線粒體:4–5 μM(需增強(qiáng)信噪比)。
梯度測(cè)試:0.5–10 μM范圍篩選合適濃度。
先用無(wú)水DMSO配制成1–10 mM母液,再稀釋至緩沖液(避免直接用水溶解);
母液分裝后-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融(≤3次)。
使用含血清培養(yǎng)基直接稀釋(血清蛋白干擾探針結(jié)合);
未過(guò)濾除菌(細(xì)菌污染導(dǎo)致熒光異常)。
孵育時(shí)間:室溫避光15–30分鐘(過(guò)久易內(nèi)化至胞質(zhì));
洗滌步驟:用無(wú)染料緩沖液沖洗3次,減少背景信號(hào)。
神經(jīng)元:染色后靜置10分鐘再成像(平衡膜分布);
線粒體:聯(lián)合Mitotracker驗(yàn)證共定位。
&相關(guān)試劑
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本試劑用于科研領(lǐng)域,其他用途概不適用!