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山東鑫之恒儀器儀表有限公司

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液相色譜（HPLC）如何選擇色譜柱

發(fā)布時間：2025-6-17

HPLC高效液相色譜柱包含與支持材料鍵合的固定相（通常為多孔硅膠顆粒），以提供較大的表面積。固定相為樣本組分的分離提供了基礎。

樣本的物理化學特性、固定相化學組成、流動相組成、流速和色譜柱溫度決定了組分通過色譜柱的速率。研究人員可從各種固定相化學組成和色譜柱尺寸（如長度、內徑和支持粒徑）中進行選擇。

色譜柱類型	固定相	流動相	應用
反相 (RP)	非極性，如 C18 或苯基	水和極性有機溶劑的混合物	占 HPLC 分離的大多數(shù)
正相 (NP)	極性，如未結合硅膠	低極性有機溶劑的混合物	不溶于水的樣本和異構體
親水作用 (HILIC)	極性，如硅膠或酰胺鍵合相	水和非極性有機溶劑的混合物	反相液相色譜分析對高極性樣品的保留較差
離子交換 (IEX)	可離子化基團	通常為鹽加緩沖液的水溶液	可離子化樣本和大生物分子
離子對	非極性反相色譜柱	非極性條件加離子配對試劑	反相對酸或堿的保留較差
手性	手性基團，如多糖或環(huán)糊精	分析物和 SP 依賴物，可以是 RP、NP、極性有機物等	對映體（如外消旋藥物混合物）的分離/純化
疏水相互作用 (HIC)	非極性，短烷基鏈或苯基	高鹽緩沖液梯度，非變性條件	蛋白質，通常為抗體
體積排阻 (SEC)	惰性色譜柱，如右旋糖酐聚合物	與含水或有機流動相配合使用	大生物分子或合成聚合物

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