暗視野顯微鏡【Dark field Microscope】的原理和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：在日常生活中，室內(nèi)飛揚(yáng)的微?；覊m是不易被看見(jiàn)的，但在暗的房間中若有一束光線從門(mén)縫斜射進(jìn)來(lái)，灰塵便粒?？梢?jiàn)了，這是光學(xué)上的丁達(dá)爾現(xiàn)象。


暗視野顯微鏡就是利用此原理設(shè)計(jì)的。它的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)主要是使用遮光板或暗視野聚光器，常用的是拋物面聚光器，使光源的光束被阻擋．不能由下而上地通過(guò)標(biāo)本進(jìn)入物鏡。從而使光線改變途徑，傾斜地照射在觀察的標(biāo)本上，標(biāo)本遇光發(fā)生反射或散射，散射的光線投入物鏡內(nèi)，因而整個(gè)視野是黑暗的。在暗視野中所觀察到的是被檢物體的衍射光圖像．并非物體的本身，所以只能看到物體的存在和運(yùn)動(dòng)，不能辨清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。但被檢物體為非均質(zhì)時(shí)，并大于1／2波長(zhǎng)，則各級(jí)衍射光線同時(shí)進(jìn)入物鏡，在某種程度上可觀察物體的構(gòu)造。一般暗視野顯微鏡雖看不清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)，但卻可分辨0.004um以上的微粒的存在和運(yùn)動(dòng)，這是普通顯微鏡(的分辨力為0.2um)所不具有的特性，可用以觀察活細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和細(xì)胞內(nèi)微粒的運(yùn)動(dòng)等。

暗視野顯微鏡遮光板的制作：普通顯微鏡只要聚光器是可以拆卸的，支架的口徑適于安裝暗視野聚光器，即可改裝成暗視野顯微鏡。在無(wú)暗視野聚光器時(shí)，可用厚黑紙片制作一個(gè)遮光板，放在普通顯微鏡的聚光器下方的濾光片框上，也能得到暗視野效果。
(1)．將顯微鏡聚光器調(diào)到位置，用低倍鏡對(duì)好焦距。
(2)．取下目鏡，從鏡筒中觀察并調(diào)節(jié)光闌的大小，使其與鏡筒中所見(jiàn)物鏡的視野相等。
(3)．用厚黑紙剪制擋光板。外圈直徑與濾光片框架相同，部分的大小與調(diào)節(jié)好的光闌孔徑一樣(可用半透明的小紙片，放在通光孔處聚光鏡鏡面上，紙上顯示的光斑即為光闌的孔徑，再用圓規(guī)量取大小)。
(4)．將擋光板放在濾光片框架上，開(kāi)大光闌進(jìn)行樣品觀察。

上海滬杏光學(xué)2015