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樹突狀細胞（DC）為先天性和適應(yīng)性免疫反應(yīng)提供了關(guān)鍵性的。這些特化細胞具有捕獲、處理、并將抗原呈遞給原態(tài)T細胞以促進其分化和激活的能力。盡管所有的樹突狀細胞都能夠呈遞抗原，但它們卻是一個異質(zhì)性的細胞群。幾種樹突狀細胞亞群已經(jīng)鑒定出，它們在位置、表型和免疫功能上各不相同。這種可塑性使得它們在呈遞不同微生物抗原或損傷細胞成分時有差異地形成免疫反應(yīng)。

人類血液中大約1-10%的外周血單核細胞（PBMC）為樹突狀細胞。這種稀缺，以及相對低豐度的*標記物和不斷發(fā)現(xiàn)的新亞群，使得分離樹突狀細胞進行功能研究成為了一個挑戰(zhàn)。為了解決這一難題，R&D Systems現(xiàn)在開發(fā)了一種負選試劑盒，能夠富集從人類血液中分離出的樹突狀細胞。與正選試劑盒不同，MagCellect Human Blood DC Isolation Kit（目錄號 MAGH110）讓分離出的樹突狀細胞群未被觸碰，減少了細胞在分選過程中發(fā)生改變的風(fēng)險。對用MagCellect Kit分離出的樹突狀細胞群進行流式細胞分析，證實超過90%的細胞均為CD14–CD19–BDCA1+BDCA2+BDCA3+ （圖1A）。其中2-8%為BDCA2+CD45+漿細胞樣樹突狀細胞（pDC；圖1B），82-88%為髓樣樹突狀細胞（mDC）。mDC細胞群中有20-40%為BDCA1+CD11c+，20-40%為BDCA3+CD11c+，10-20%為CD16+CD11c+，10-25%為CD56+MHCII+，表明MagCellect Kit能夠分離zui近鑒定出的CD56+和CD16+ mDC亞群（圖1C和1D）。

賽默飛世爾公司鄭重聲明：2011年度NanoDrop品牌的2000及2000C產(chǎn)品已*給基因有限公司（Gene Company Limited）。對于市場出現(xiàn)的非基因有限公司（Gene Company Limited）經(jīng)營的本公司產(chǎn)品，本公司概不負責其儀器質(zhì)量以及相關(guān)售后服務(wù)保障。

對富集的全部DC細胞群的功能分析證實，分離出的細胞維持了在混合白細胞反應(yīng)中激活異基因T細胞增殖的能力（圖2）。由于分離出的樹突狀細胞在整個富集過程中未被抗體觸碰，所以它們有可能比用正選技術(shù)分離出的細胞保留了更多的功能特性。此外，MagCellect Kit通過兩種抗體混合物來標記不想要的細胞，無需分離柱，比其他試劑盒更為易用。R&D Systems 新推出的MagCellect Human Blood Myeloid Dendritic Cell Isolation Kit（目錄號MAGH120）也具有類似的優(yōu)點。

如需了解這些試劑盒的更多信息，請訪問我們的 /go/CellSelection 或通過
/go/DendriticCells 了解與樹突狀細胞研究相關(guān)的其他產(chǎn)品信息。

 

圖1. 利用流式細胞儀對MagCellect Human Blood Dendritic Cell Isolation Kit分離出的樹突狀細胞進行分析。MagCellect Human Blood Dendritic Cell Isolation Kit（目錄號MAGH110）可以富集來自人類血液樣品的所有樹突狀細胞（DC）。利用圖示的抗體通過流式細胞儀檢測不同的樹突狀細胞亞群，富集前（上圖）和富集后（下圖）。A. 利用抗CD14、抗CD19、抗CD1c/BDCA1、抗DLEC/BDCA2和抗Thrombomodulin/BDCA3抗體檢測所有樹突狀細胞。B. 利用抗DLEC/BDCA2和抗CD45抗體檢測漿細胞樣樹突狀細胞（pDC）。C. 利用抗CD56和抗MHCII抗體檢測CD56+MHCII+髓樣樹突狀細胞（mDC）。D. 利用抗CD16和抗CD11c抗體檢測CD16+CD11c+ mDC。所檢測亞群的百分比可能隨供體不同而變化。

 

圖2. 利用MagCellect Human Blood DC Isolation Kit分離的樹突狀細胞誘導(dǎo)異基因T細胞增殖。利用MagCellect Human Blood Dendritic Cell Isolation Kit（目錄號MAGH110）從人類血液中分離出樹突狀細胞。利用混合白細胞反應(yīng)分析評估這些細胞刺激異基因T細胞增殖的能力。T細胞或單獨培養(yǎng)（金線），或用分離出的樹突狀細胞連續(xù)稀釋（藍線），或以培養(yǎng)的單核細胞來源的樹突狀細胞作為陽性對照（綠線），T細胞:DC的起始比例為8:1。通過摻入3H-胸腺嘧啶脫氧核苷在3天后測定T細胞增殖。