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技術(shù)文章
核酸探針雜交技術(shù)檢測豬繁殖與呼吸綜合征
發(fā)布時間：2011-4-6核酸探針雜交技術(shù)。Sur等（1996）以PRRSV的RNA為模板，通過RT-PCR擴增ORF7中的433bp片段，應(yīng)用地高辛標記方法制備PRRSV特異性cDNA探針，建立了檢測PRRSVRNA的原位雜交技術(shù)。
該方法可以在肺、淋巴組織、肺泡巨噬細胞（尸體剖檢后灌洗獲得）、淋巴集結(jié)、腎臟的感染細胞內(nèi)檢測到PRRSVRNA，較免疫組化具有更高的敏感性和特異性，特別是檢測感染后期細胞內(nèi)的PRRSV RNA。應(yīng)用生物素標記方法制備互補于ORFlb（LV株）和ORF7（VR 2385株）的兩種寡核苷酸探針，建立了檢測福爾馬林固定肺和淋巴組織中PRRSVRNA的原位雜交技術(shù)（Park，et a1，1996），該技術(shù)有很好的敏感性，但操作比較煩瑣，在診斷上也較少應(yīng)用。