1.機(jī)械法

 

　　機(jī)械法是CHO細(xì)胞最早使用的傳代方法，可采用開放式旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶或滾筒式培養(yǎng)瓶進(jìn)行傳代。這種方法一般使用平滑的研磨器或壓縮器，先將細(xì)胞切斷，然后用PBS或其它體液沖洗，最后將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)生長。這種方法操作簡(jiǎn)單，效率高，但細(xì)胞的數(shù)量容易受到機(jī)械損傷的影響。

 

　　2.酶消化法

 

　　酶消化法在機(jī)械法的基礎(chǔ)上發(fā)展而來，采用胰酶等酶類來消化細(xì)胞，可以降低細(xì)胞損傷，使得細(xì)胞轉(zhuǎn)移更加穩(wěn)定。先用PBS防止細(xì)胞損傷，然后加入胰酶等酶類，將細(xì)胞消化，最后將被消化的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中培育。這種方法無需使用研磨器或壓縮器就能快速分離細(xì)胞，傳代效率也很高。

 

　　3.縮減法

 

　　縮減法是一種時(shí)間較短、效率較高的CHO細(xì)胞傳代方法，其步驟是:將舊的細(xì)胞培養(yǎng)基全部或部分抽取，加入和新生長培養(yǎng)基相同的成分，再加入較小的細(xì)胞數(shù)量，繼續(xù)培養(yǎng)生長。這種方法減少了細(xì)胞之間的接觸，防止了細(xì)胞的受空氣的影響。

 

　　4.壓力法

 

　　壓力法是在縮減法的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的，采用了壓力方式來讓細(xì)胞實(shí)現(xiàn)傳代，這種方法又叫壓力透析法。適當(dāng)調(diào)整細(xì)胞密度，把細(xì)胞裝入濾膜中，然后施加合適的、足夠的水壓，讓細(xì)胞穿過濾膜，在新的培養(yǎng)基中繼續(xù)生長。這種方法操作簡(jiǎn)單，效率高。