技術(shù)文章
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法測(cè)定分析
發(fā)布時(shí)間:2022-4-29一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br>1、了解紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)、性能及使用方法
2、熟悉定性、定量測(cè)定的方法

二、實(shí)驗(yàn)原理
紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry),又稱紫外吸收光譜法( Ultraviolet Moleculor Absorption Spectrophtometry),它是研究分子吸收190.0~1100.0nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)的吸收光譜。紫外吸收光譜主要產(chǎn)生于分子價(jià)電子在電子能級(jí)間的躍遷,是研究物質(zhì)電子光譜的分析方法。通過(guò)測(cè)定分子對(duì)紫外光的吸收,可以對(duì)大量的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物進(jìn)行定性和定量測(cè)定。
是一種劇毒物質(zhì),可以致癌,已經(jīng)被列入有機(jī)污染物的黑名單。但在一些藥品、食品添加劑、消毒液等產(chǎn)品中均含有一定量的。如果其含量超標(biāo),就會(huì)產(chǎn)生很大的毒害作用。在紫外光區(qū)的吸收波長(zhǎng)λmax=270nm。對(duì)溶液進(jìn)行掃描時(shí),在270nm處有較強(qiáng)的吸收峰。
定性分析時(shí),可在相同的條件下,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品進(jìn)行波長(zhǎng)掃描,通過(guò)比較未知樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品的光譜圖對(duì)未知樣進(jìn)行鑒定。在沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)樣品的情況下,可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)譜圖或有關(guān)的電子光譜數(shù)據(jù)表進(jìn)行比較。
定量分析是在270nm處測(cè)定不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光值,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再在相同的條件下測(cè)定未知樣品的吸光度值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可得出未知樣中的含量。
三、儀器與試劑
1.紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)
2.容量瓶(1000ml、250ml)
3.比色管(50ml)
4.吸量管(5ml、10ml)
5.(AR)
準(zhǔn)確稱取0.010g于200ml蒸餾水中,溶解后定量轉(zhuǎn)移到1000ml的容量瓶中,作為儲(chǔ)備液。
于5支50ml的比色管中,用吸量管分別加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液,用蒸餾水定容至刻度,搖勻。
四、吸收波長(zhǎng)的選擇
在標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中任取一種,以水為參比,分別在波長(zhǎng)200~300nm之間以10為間隔測(cè)定其吸收波長(zhǎng),在吸光度值附近以間隔2為單位測(cè)定,直至找到吸收波長(zhǎng)。
五、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
在已篩選的波長(zhǎng)下,以水為參比分別測(cè)定上述標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,畫(huà)出C-A曲線,寫(xiě)出回歸曲線方程。
六、濃度的測(cè)定
在相同情況下,測(cè)定其吸光度。根據(jù)回歸曲線方程計(jì)算出待測(cè)濃度。
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