501高效液相色譜測定水樣中的苯酚 儀器和試劑 1、儀器: ⑴STI501液相色譜儀梯度系統(tǒng): ①流動相:乙腈、MQ水(由鋁箔紙包裹,防止其中產(chǎn)生藻類,堵塞進口) ②高壓輸液泵:并聯(lián)式微體積柱塞往復(fù)泵 型號:P501 廠家:Science ③色譜柱:固定相填充物:十八碳(C18) 型號:Vertex C18 參數(shù): 填充物粒徑:5 μm 內(nèi)徑×長度:4.6×250 mm ④檢測器:紫外檢測器(UV) 型號:UV-501 電壓:230-210V 廠家:Science ⑤超聲波清洗裝置: 型號:SX-01 ⑥進樣裝置:高壓六通進樣閥 兩個狀態(tài): Load:樣品進入六通閥,未入色譜柱 Inject:位于六通閥的樣品進入色譜柱 ⑦淋洗液(洗針、洗閥):甲醇 ⑵移液管 2 mL、5 mL各一支 ⑶具塞離心管10 mL三支、1.5 mL一次性離心管一支 2. 試劑:甲醇(色譜純); 苯酚標(biāo)準(zhǔn)使用溶液(10 mg/L) 待測水樣。 實驗步驟 1 標(biāo)準(zhǔn)系列配制 取苯酚標(biāo)準(zhǔn)使用液0.50、1.00、2.00 mL于10 mL的具塞離心管中,用甲醇定容至5 mL,混勻。待測。 2 樣品的制備 取水樣約1 mL于1.5 mL一次性離心管中。待測。 3 色譜參數(shù) 色譜柱:C18 柱; 流動相:乙腈、水; 梯度洗脫程序: 洗脫時間 | 0:00 | 4:00 | 4:01 | 5:00 | 5:01 | 8:00 | 乙腈(%) | 65 | 65 | 75 | 75 | 65 | 65 |
流速:1.0 mL/min; 柱溫:室溫; 進樣量:20 μL; 檢測器:紫外檢測器,檢測波長280 nm 測定 測定標(biāo)準(zhǔn)系列,再測定樣品。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)系列中苯酚的保留時間,定性確定樣品中的目標(biāo)物。 記錄標(biāo)準(zhǔn)系列和樣品中目標(biāo)物的峰面積。 數(shù)據(jù)記錄與計算 (1)標(biāo)準(zhǔn)系列c=4mg/mL的譜圖及樣品的譜圖: 樣品譜圖(圖2)中,三個明顯高的峰的記錄數(shù)據(jù)如下表 表1 樣品的譜圖中三個峰的特征數(shù)據(jù) | 保留時間(t/min) | 色譜峰面積/counts | 色譜峰高/mAU | 個峰 | 3.892 | 22907 | 2928 | 第二個峰 | 4.307 | 182.47 | | 第三個峰 | 4.879 | 20567 | |
圖1 標(biāo)準(zhǔn)系列c=4mg/mL的譜圖 圖2 樣品的譜圖 2. 標(biāo)準(zhǔn)系列和樣品中苯酚的保留時間、峰面積、峰高等實驗數(shù)據(jù): 表2 標(biāo)準(zhǔn)系列和樣品中苯酚的譜圖峰的特征數(shù)據(jù) | 標(biāo)準(zhǔn)樣品體積/mL | 保留時間t/min | 色譜峰面積/counts | 色譜峰高/mAU | 濃度/(mg/mL) | 1 | 0.5 | 3.951 | 17640 | 1209 | 1.0 | 2 | 1.0 | 3.837 | 34754 | 2963 | 2.0 | 3 | 2.0 | 3.773 | 66625 | 5258 | 4.0 | 樣品 | - | 3.892 | 22907 | 2928 | 1.3 |
參考文獻: 關(guān)鍵詞:苯酚,高效液相色譜法,501液相色譜儀 |
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