STED 和 STELLARIS： 重新設(shè)計(jì)超高分辨率

同一臺(tái)設(shè)備中的 STED 和 STELLARIS 不僅為您提供出色的共聚焦能力，還可以讓您通過(guò)超高分辨率獲得深度樣本信息。

洞察力

得益于我們的二代白激光、優(yōu)化的光路、快速 Power HyD 檢測(cè)器和多達(dá)3條STED激光譜線的獨(dú)特組合，您可在納米級(jí)別上以及整個(gè)光譜范圍內(nèi)同時(shí)研究多個(gè)事件和分子相互作用。

高潛力

TauSTED 是我們新開(kāi)發(fā)的基于熒光壽命的 STED 方法，可提供圖像質(zhì)量和溫和的活細(xì)胞成像條件，將 STED 超高分辨率成像提升到更高水平。

生產(chǎn)力

通過(guò)全新的 ImageCompass 用戶界面可輕松獲得令人驚嘆的共聚焦和 STED 圖像，只需點(diǎn)擊幾次即可設(shè)置好實(shí)驗(yàn)。

STELLARIS STED 和 STELLARIS 8 STED

STELLARIS 提供兩種方法將 STED 集成到您的系統(tǒng)中： STELLARIS STED 是一站式 STED 解決方案，STELLARIS 8 STED 則是我們的可升級(jí)系統(tǒng)。 兩者在 STED 性能方面都具有相同的優(yōu)勢(shì)，因此您可以在決定哪一個(gè)您的需求時(shí)重點(diǎn)考慮 STELLARIS 的額外功能。

STELLARIS 8 STED

搭載在STELLARIS 8 上的 STED 性能*，可提供2D和3D納米顯微成像，STED 激光譜線多達(dá)3條

●白激光的激發(fā)光波長(zhǎng)從440納米到790納米

●可選擇 Power HyD S、HyD X 和 HyD R 用于紅光擴(kuò)展應(yīng)用

●TauSTED 采用 TauSense 技術(shù)，或者與 FALCON 結(jié)合可進(jìn)行全面的 FLIM 分析

●可升級(jí)其他功能模塊（FALCON、FCS）

STELLARIS STED

一站式 STED，可提供2D和3D納米顯微成像，STED 激光譜線多達(dá)3條

●白激光的激發(fā)光波長(zhǎng)從485納米到685納米

●可提供 Power HyD S 和 HyD X

●TauSTED 采用 TauSense 技術(shù)

性能*，可觀察到樣本的更多細(xì)節(jié)、解析樣本中的分子間關(guān)系

為了了解細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)、分化和細(xì)胞 分裂等過(guò)程背后的機(jī)制，您需要在細(xì)胞原生環(huán)境中獲得盡可能好的圖像質(zhì)量、靈活設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)以及 快速觀察特定的生物分子。

由于與 STELLARIS 平臺(tái)相結(jié)合，STED 受益于我們的二代白激光（WLL）/AOBS技術(shù)、新優(yōu)化的光路、Power HyD 檢測(cè)器系列的光譜檢測(cè) 以及多條 STED 激光譜線（592、660、775納米）。 STED 提供明亮的圖像，展現(xiàn)出納米級(jí)細(xì)節(jié)的結(jié)構(gòu)特征，使您能夠極其靈活地選擇熒光團(tuán)，跟蹤高度動(dòng)態(tài)的過(guò)程。

STED 用于瘧疾研究： 3D STED 775 能夠揭示裂殖體侵入紅細(xì)胞的機(jī)制。

圖像顯示了 RON4（紫色）與蛋白PfRh5（左側(cè)，綠色）、PfRipr（中間，綠色）、

PfCyRPA（右側(cè)，綠色）的疊加。 藍(lán)色是細(xì)胞核，灰色是紅細(xì)胞膜。 比例尺： 1微米。

圖片由澳大利亞沃爾特和伊麗莎·霍爾醫(yī)學(xué)研究所的 Jennifer Volz 和 Alan Cowman

以及德國(guó)歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的 Marko Lampe 提供。

增加在納米級(jí)別上可同時(shí)研究的目標(biāo)數(shù)量

多色熒光標(biāo)記能夠揭示細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)之間的關(guān)系，因?yàn)槟梢詫?duì)具有分子特異性的不同組分成像。

STED 和 STELLARIS 特別適合多色應(yīng)用。 您可以在光譜的紅光區(qū)域使用優(yōu)選染料，在綠光區(qū)域選擇熒光蛋白，或在橙光區(qū)域使用新型熒光探針。 您可以進(jìn)行多種熒光共定位研究，以超衍射極限的細(xì)節(jié)進(jìn)行解析。

我們的光譜檢測(cè)技術(shù)可提供多達(dá)5個(gè)支持 STED 的 Power HyD 探測(cè)器，可讓您增加需要在時(shí)間和空間上定位的目標(biāo)的數(shù)量。 此外，Power HyD檢測(cè)器的數(shù)字化功能、速度以及1.5納秒全系統(tǒng)死區(qū)時(shí)間可保證您在信噪比和背景方面獲得出色的圖像質(zhì)量，同時(shí)光子收集/像素停留時(shí)間比 APD 至少多10倍。

STED 用于發(fā)育生物學(xué)：果蠅胚胎全標(biāo)本制備中 RNA 的 smFISH*。 探針被直接標(biāo)記，

沒(méi)有信號(hào)放大。 上圖： 三色 TauSTED 775 可捕獲 hb CalFluor 610（青色）、

gt Quasar 670（綠色）和 eve Quasar 705（紫色）的信號(hào)。 下圖：整個(gè)果蠅胚胎的共聚焦成像。

樣本由英國(guó)曼徹斯特大學(xué) Tom Pettini 提供。*單分子原位雜交

具有出色亮度和分辨率的2D和3D STED 成像

使用 STED 和 STELLARIS，您在2D和3D圖像中都可以獲得所需的結(jié)果，因?yàn)榉直媛士稍趚、y和z軸上調(diào)節(jié)。 為確保您在2D和3D中獲得理想的亮度和分辨率，我們?yōu)槟峁﹥?yōu)化的光學(xué)器件，確保整個(gè)光譜中激發(fā)光和 STED激光的PSF疊加， 并且不會(huì)因自適應(yīng)校正而失去定量分析能力。 我們專門開(kāi)發(fā)了 STED WHITE 物鏡，確保為各種 STED 實(shí)驗(yàn)提供優(yōu)化條件：

●STED WHITE 100x 油鏡專門用于提升分辨率，為日常的固定樣本成像提供出色的性能

●STED WHITE 93x 甘油物鏡采用 motCORR 全電動(dòng)校正環(huán)技術(shù)，深度觀察樣本時(shí)可針對(duì)溫度變化、折射率失配和不均勻性進(jìn)行自適應(yīng)校正

●如前所述，使用 motCORR 的 STED WHITE 86x 水介質(zhì)物鏡也可進(jìn)行自適應(yīng)校正，是溫和的活細(xì)胞應(yīng)用以及 STED-FCS 的理想選擇 (1)。

(1) High photon count rates improve the quality of super-resolution fluorescence fluctuation spectroscopy，作者 F. Schneider 等， J. Phys D: Appl. Phys. 53 164003, 2020。

TauSTED： 納米顯微成像與熒光壽命

我們專有的 TauSTED 技術(shù)可提供出色的分辨率、圖像質(zhì)量和樣本保護(hù)，大大擴(kuò)展了 STED 實(shí)驗(yàn)的潛力。

TauSTED 利用 STED 所引起的熒光壽命梯度將來(lái)自 STED 過(guò)程和來(lái)自背景的光子進(jìn)行區(qū)分。 因此，您可以顯著減少光劑量，獲得超越傳統(tǒng) STED* 的成像分辨率，實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)時(shí)間的延時(shí)活細(xì)胞納米顯微成像。

您可以將 TauSTED 用于所有 STED 實(shí)驗(yàn)，特別是多色熒光共定位研究。 您還可以使用 FALCON 分離光譜重疊的 STED 染料。

*分辨率<><>

TauSTED 可在極低的光劑量下提供出色的分辨率

當(dāng)您為 STED 實(shí)驗(yàn)尋找低照明策略時(shí)，有一個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題： 多低才算低？ 這個(gè)問(wèn)題并不容易回答，因?yàn)檫@取決于您選擇的樣本和熒光團(tuán)。

我們不會(huì)隨意做出與您的具體實(shí)驗(yàn)不相關(guān)的光劑量減少承諾。 我們能做的是向您展示 TauSTED 可顯著減少激發(fā)光和 STED 光劑量，使您可以成功地在時(shí)間和空間上進(jìn)行測(cè)量。 TauSTED 可幫助您消除背景，達(dá)到理想分辨率，避免高補(bǔ)償劑量，避免失去定量分析能力。

這些優(yōu)勢(shì)都源自于 STED 與我們 STELLARIS 平臺(tái)功能的獨(dú)特組合：超快速 Power HyD 檢測(cè)器以及 TauSense（STELLARIS STED和STELLARIS 8 FALCON）和 FLIM（STELLARIS 8 FALCON）提供的熒光壽命維度。

STED 用于細(xì)胞生物學(xué)： TauSTED 660 可揭示核孔（NPC）在 COS7 細(xì)胞中的分布，

實(shí)驗(yàn)用 AF555 標(biāo)記Nup 復(fù)合物 。 只需2%的 STED 光即可顯示出更多細(xì)節(jié)。

一抗 mAb414 可識(shí)別核孔籃的幾個(gè)核孔蛋白并形成點(diǎn)狀染色。

使分辨率超越傳統(tǒng)極限

TauSTED 可測(cè)量每個(gè) STED 實(shí)驗(yàn)中采集的基于熒光壽命的信息，并實(shí)時(shí)測(cè)定熒光團(tuán)的 STED 響應(yīng)。 無(wú)論您使用哪種激發(fā)光和 STED 譜線（592、660、775），這些信息都能讓您提高圖像質(zhì)量（信噪比），利用物理原理消除背景中的光子，使分辨率超越基于強(qiáng)度的STED。

TauSTED 能夠自動(dòng)完成所有這些功能，使您可以專注于樣本，觀察那些在一般情況下容易丟失的細(xì)節(jié)。

STED 和 DNA 折紙術(shù)成像： TauSTED 775 對(duì)標(biāo)稱尺寸為23納米的 GATTA-Bead R

的解析分辨率小于30納米。 比例尺： 1微米。

溫和 STED 超高分辨率用于活細(xì)胞擴(kuò)展成像

較低的激發(fā)光和 STED 光劑量有利于保護(hù)樣本。

這種能力有助實(shí)現(xiàn)更長(zhǎng)時(shí)間的延時(shí)實(shí)驗(yàn)，即更多幀數(shù)或更大體積的成像，同時(shí)不降低空間分辨率。

使用 STED-FLIM 分離具有重疊光譜的不同熒光

在 STELLARIS 8 上組合使用 STED 和 FALCON 模態(tài)時(shí)，可以用推薦 STED 熒光團(tuán)（遠(yuǎn)紅發(fā)射）進(jìn)行多色超高分辨率解析，因?yàn)槟梢允褂貌煌N類的熒光壽命將其分離。

這些熒光團(tuán)的發(fā)射光譜嚴(yán)重重疊，無(wú)法通過(guò)傳統(tǒng)的強(qiáng)度采集方法進(jìn)行區(qū)分。 STED-FLIM 與我們的自動(dòng)相量分離技術(shù)相結(jié)合，可通過(guò)這些熒光團(tuán)的壽命和單個(gè)檢測(cè)器清楚地將它們分離。

STED-FLIM 用于細(xì)胞生物學(xué)： STED 775 和 FALCON 自動(dòng)相量分離技術(shù)可以利用

不同熒光的壽命來(lái)分離具有重疊光譜的熒光種類。 在標(biāo)記了波形蛋白和肌動(dòng)蛋白的

HEK 細(xì)胞中，單純的光子計(jì)數(shù)強(qiáng)度信息（灰色）顯示兩種結(jié)構(gòu)沒(méi)有區(qū)別，而 STED-FLIM

（綠色，波形蛋白AF647；紫色，Actin ATTO 647N-phalloidin）可以明顯區(qū)分它們。 比例尺： 4微米。

樣本由德國(guó)杜塞爾多夫 CAI 的 Sebastian H?nsch 和 Stephanie Weidtkamp-Peters 提供。

易于設(shè)置 STED，提高工作效率

STELLARIS 可以讓新手和專家都能輕松獲得 STED圖像。 現(xiàn)在，您只需點(diǎn)擊幾下鼠標(biāo)即可設(shè)計(jì)共聚焦和多色組合實(shí)驗(yàn)以及2D和3D STED。

●ImageCompass 專注于樣本特征，能夠智能引導(dǎo)您獲得可信的結(jié)果。

●一鍵式光束自動(dòng)對(duì)準(zhǔn)，保護(hù)您的樣本免受過(guò)度光照，

全自動(dòng)匹配染料理想的激發(fā)波長(zhǎng)，確保優(yōu)化的 STED 性能。

●使用 LAS X Navigator 對(duì)大面積區(qū)域快速成像，并選擇您感興趣的區(qū)域進(jìn)行 STED 成像。

●通過(guò) STELLARIS 功能，例如訪問(wèn)原始數(shù)據(jù)和快速高效光子計(jì)數(shù)，可驗(yàn)證您的結(jié)果。

STELLARIS 上用于 STED 的 ImageCompass 用戶界面。

在同一個(gè)平臺(tái)上快速驗(yàn)證結(jié)果

STED 和 STELLARIS 的組合意味著您可以驗(yàn)證您的發(fā)現(xiàn)，因?yàn)?STED、共聚焦、LIGHTNING 和 TauSense 數(shù)據(jù)都在同一個(gè)系統(tǒng)中。

這種組合還意味著您可以訪問(wèn)您的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行定量分析。 TauSTED 技術(shù)可以從熒光壽命信息的物理讀數(shù)中除去背景信息以及調(diào)節(jié)分辨率。

使用 STELLARIS，您始終能夠控制納米顯微成像實(shí)驗(yàn)。

STED 用于微生物學(xué)： 使用相關(guān)三色共聚焦 LIGHTNING-STED 成像的細(xì)菌鞭毛，

可使用互補(bǔ)方法研究和驗(yàn)證樣本。 樣本由德國(guó)柏林洪堡大學(xué)的 Marc Erhardt 提供。