CAPCELL CORE 系列色譜柱使用說(shuō)明書
CAPCELL CORE 系列色譜柱以核殼型高純度硅膠作為基材，表面包覆單層有機(jī)硅聚合 物薄膜后，在其上鍵合固定相的高性能色譜柱。
核殼填料示意圖
該系列色譜柱具有高柱效低壓力的特點(diǎn)，能夠在常規(guī) HPLC 儀器系統(tǒng)上達(dá)到超高壓色譜 柱分離效果，是快速高效分析的不二選-擇。物性值如下表所示。
類型 | 官能團(tuán) | 細(xì)孔徑 （nm） | 粒徑 (μm） | 比表面積 （m2/g） | C% | 密度 (μmol/m2） | pH 范圍 | 耐壓 |
CORE | C18 | 9 | 2.7 | 150 | 7 | 2.9 | 1.5-10 | 60 |
CORE | C27(AQ) | 16 | 2.7 | 90 | 4 | - | 2-10 | 60 |
CORE CORE | PFP ADME | 9 9 | 2.7 2.7 | 150 150 | 5 5.5 | - - | 2-9 2-9 | 60 60 |
為了能夠長(zhǎng)期且穩(wěn)定地使用色譜柱，請(qǐng)?jiān)谑熳x該使用說(shuō)明書后進(jìn)行正確使用。
1. 色譜柱的啟用
每一根色譜柱在出廠前，都經(jīng)過了嚴(yán)格的出廠測(cè)試，只有滿足出廠標(biāo)準(zhǔn)方可出售。每一 根 CAPCELL CORE 系列色譜柱的柱盒內(nèi)均含有色譜柱的性能測(cè)試報(bào)告供使用者查看。性能 測(cè)試報(bào)告包含了色譜柱柱號(hào)，色譜柱規(guī)格，填料批次號(hào)，理論塔板數(shù)和所用的測(cè)試條件等的 檢測(cè)數(shù)據(jù)。為了保證色譜柱的正常使用，建議在使用前檢查以下事項(xiàng)：
1.檢查色譜柱包裝盒是否完整，有無(wú)拆封和碰撞痕跡。
2.色譜柱標(biāo)簽是否與包裝上的柱號(hào)、柱型相符，色譜柱兩端堵頭是否完整。
3.色譜柱包裝盒內(nèi)是否有色譜柱性能測(cè)試報(bào)告。
2. 色譜柱的安裝
2.1 安裝色譜柱之前，請(qǐng)使用不含有緩沖鹽、強(qiáng)酸或強(qiáng)堿的流動(dòng)相對(duì)液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行沖洗 置換。
2.2 為盡量減少死體積，色譜柱的接頭使用了外徑 1/16 英寸配管的螺頭(MALE NUT)。請(qǐng) 確保裝置的配管接頭正確連接，并且錐箍的頂端已插入接頭內(nèi)側(cè)(參照?qǐng)D 1)。若配管不 匹配，特別是直接使用其他類型色譜柱所用配管時(shí)，錐箍前端的配管長(zhǎng)度（圖 1 中的 V）
與色譜柱尾端接頭的長(zhǎng)度（圖 1 中的 L）經(jīng)常會(huì)不同，因而引發(fā)故障。
若 L＞V，會(huì)產(chǎn)生死體積，甚至出現(xiàn)色譜峰展寬或拖尾現(xiàn)象，并且分離變差。
若 L＜V，由于錐箍無(wú)法密封，所以會(huì)導(dǎo)致漏液。
※ 頻繁更換色譜柱，可能會(huì)導(dǎo)致螺頭的錐箍損壞而發(fā)生漏液現(xiàn)象。這種情況下若進(jìn)一步擰
緊，螺母的頭部可能會(huì)發(fā)生斷裂。
圖 1 色譜柱安裝示意圖
2.3 新色譜柱的保存液請(qǐng)參看色譜柱的性能測(cè)試報(bào)告，CORE 系列色譜柱為純乙腈。為避免 緩沖鹽的析出，請(qǐng)使用與流動(dòng)相比例相同的水和有機(jī)相混合溶液對(duì)色譜柱和儀器進(jìn)行沖 洗，隨后再置換為檢測(cè)用流動(dòng)相進(jìn)行平衡，直至基線平穩(wěn)。
3．色譜柱的使用
3.1 流動(dòng)相 可用流動(dòng)相的種類與一般化學(xué)鍵合型硅膠類色譜柱所使用的流動(dòng)相相同，使用 含有離子對(duì)試劑等表面活性劑的流動(dòng)相，色譜柱的壽命相對(duì)會(huì)變短。
3.2 pH 范圍 CAPCELL CORE 系列色譜柱的可用 pH 范圍請(qǐng)參考物性表。
為防止色譜柱的早期劣化，請(qǐng)注意流動(dòng)相的 pH 不要超過使用范圍。如果 pH 頻繁發(fā)生 大幅度的變化，會(huì)引起重現(xiàn)性變差、色譜柱提前劣化等問題。
3.3 壓力范圍 CAPCELL CORE 耐壓 60MPa ，超壓使用有可能會(huì)造成柱床坍塌。
2.4 使用方向 請(qǐng)按照色譜柱標(biāo)簽所示方向進(jìn)行安裝，盡量不要雙向混用。
2.5 分析注意事項(xiàng)
2.5.1 樣品
1.請(qǐng)盡量將樣品溶解在流動(dòng)相中進(jìn)行分析。
2.樣品溶液若采用洗脫能力強(qiáng)的溶劑，會(huì)造成色譜峰的展寬或裂峰。
3.樣品若不易溶于流動(dòng)相中，進(jìn)樣后會(huì)在色譜柱中析出，造成柱壓的急劇上升，故需注意。
4.樣品溶液的 pH 請(qǐng)不要超過色譜柱的可用 pH 范圍。
2.5.2 儀器
1.請(qǐng)配備在線過濾頭（0.45μm 以下濾膜），流動(dòng)相去除雜質(zhì)后再使用在線脫氣機(jī)進(jìn)行充分 脫氣。
2.為防止由異物導(dǎo)致的色譜柱入口處過濾篩板堵塞，建議使用線上過濾器。
4．色譜柱的沖洗保存
4.1沖洗
當(dāng)色譜柱峰形發(fā)生分叉、拖尾、前延等情況，或保留時(shí)間波動(dòng)、分離度降低和壓力升高等情 況時(shí) ，表明色譜柱受到一定污染，可使用適當(dāng)方法進(jìn)行沖洗。
1. 如流動(dòng)相不含緩沖鹽，可使用 80%甲醇或乙腈對(duì)色譜柱沖洗 20-30 個(gè)柱體積。
2. 如流動(dòng)相含緩沖鹽，可先使用 80%水和有機(jī)相混合溶液沖洗 40 個(gè)柱體積充分去除緩沖
鹽，再使用 80%甲醇或乙腈沖洗 20-30 個(gè)柱體積。
3. 對(duì)于鹽析的色譜柱，建議使用 80%水和有機(jī)相混合溶液，在低流速下對(duì)色譜柱進(jìn)行沖洗 （如 100 μL/min）過夜。
4. 在使用梯度條件前，建議使用高比例有機(jī)相對(duì)色譜柱進(jìn)行沖洗，再平衡至梯度起始流動(dòng)
相，但注意不要發(fā)生鹽析。
5. 如果使用特殊流動(dòng)相可直接致電技術(shù)中心進(jìn)行咨詢。
4.2 保存
1. 若一個(gè)月以內(nèi)短期保存，如流動(dòng)相中含緩沖鹽、酸或堿，建議使用與流動(dòng)相比例相同不
含鹽的溶劑充分沖洗置換 ，再使用60%乙腈進(jìn)行置換保存。請(qǐng)用附帶的堵頭密封，保存在 溫差小的陰冷處。
2. 若一個(gè)月以上的長(zhǎng)期保存，充分置換流動(dòng)相中的緩沖鹽、酸或堿后，用出廠時(shí)的溶劑置 換（100%乙腈）并用附帶的堵頭密封，保存在冷暗處。
3. 避免使用 100%水相清洗色譜柱。
5.故障與對(duì)策
使用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定時(shí)所出現(xiàn)的問題，存在各種原因。但由于無(wú)法將其一一列 舉， 故在此只說(shuō)明色譜柱及其周邊較容易出現(xiàn)的問題 ， 或請(qǐng)致電技術(shù)中心進(jìn)行咨詢 。
問題現(xiàn)象 | 原因 | 對(duì)策 |
1. 色譜柱壓 升高 | 異物堵塞 ①流動(dòng)相、樣品溶液中雜質(zhì)、不溶物 ②配管內(nèi)的雜質(zhì)或不溶物 ③活塞密封圈的碎片④樣品成分的析出 | ? 預(yù)先用濾膜對(duì)流動(dòng)相、樣品溶液 進(jìn)行過濾 ? 安裝線上過濾器 ? 清理配管及更換活塞密封圈 ? 使 用流動(dòng)相配制樣品溶液 |
2. 色譜峰分 裂、拖尾、 展寬 | ①由于配管連接錯(cuò)誤導(dǎo)致產(chǎn)生死體積 ②流動(dòng)相條件不適合 ③色譜柱劣化※若色譜柱劣化或填充層 出現(xiàn)裂隙，則無(wú)法進(jìn)行修復(fù) | ? 重新連接配管 ? 考察 pH、鹽濃度、樣品量等 ? 考察離子對(duì)試劑濃度、pH、樣品 量等 ? 通過柱效檢測(cè)來(lái)確認(rèn)色譜 柱性能 |
3. 保留時(shí)間 延遲或不 穩(wěn)定 | ①漏液（根據(jù)泵壓值進(jìn)行判斷） ②流動(dòng)相條件不適合③色譜柱的平衡時(shí) 間不夠 | ? 檢查泵、配管系列的漏液情況 ? 充分平衡 |
4. 保留時(shí)間 變短 | ①使用強(qiáng)酸或堿導(dǎo)致配位基斷裂（劣化） ②流動(dòng)相條件不適合③色譜柱的平衡時(shí) 間不夠 |
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? 充分平衡 |
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