【適用范圍】

T7 RNA聚合酶（T7 RNA Polymerase）是一種是一種來源于T7噬箇體的RNA聚合酶，分子量約99kDa。專門催化5'→3'方向的RNA形成過程，對(duì)T7噬箇體啟動(dòng)子具有高特異性。T7 RNA聚合酶是一種DNA 依賴性的RNA 聚合酶,能夠在體外以單鏈或雙鏈DNA為模板，從啟動(dòng)子開始催化模板DNA下游5'→3' RNA 合成，具有高的轉(zhuǎn)錄效率。

【產(chǎn)品組分】

1×Transcription Buffer: 40 mM Tris-HCl, pH 7.8, 20 mM NaCl₂, 6 mM MgCl₂, 2 mM spermidine-HCl, 10 mM DTT

【儲(chǔ)存條件及效期】

T7 RNA聚合酶 于-20 ℃保存，有效期為24 個(gè)月。

【熱失活】

70℃，10min

【反應(yīng)體系及條件】

a. 37度孵育2小時(shí)

b. 如需去除DNA模板，加入2μL DNase I（1U/μl）終止反應(yīng)

c. 終止反應(yīng)：加入2 μL 0.2 M EDTA(pH8.0)或者 70°C反應(yīng)10 min。

【注意事項(xiàng)】

1. 轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系的配制應(yīng)在無 RNase 污染的環(huán)境中完成，操作過程建議佩戴手套以及口罩，使用高壓滅菌的水及槍頭。

2. 該酶活性強(qiáng)，對(duì)模板DNA純度要求不高，PCR產(chǎn)物經(jīng)乙醇沉淀后可直接用于轉(zhuǎn)錄。