暗視野顯微鏡【Dark field Microscope】的原理和結(jié)構(gòu)特點：在日常生活中，室內(nèi)飛揚的微?；覊m是不易被看見的，但在暗的房間中若有一束光線從門縫斜射進來，灰塵便粒粒可見了，這是光學(xué)上的丁達爾現(xiàn)象。


暗視野顯微鏡就是利用此原理設(shè)計的。它的結(jié)構(gòu)特點主要是使用遮光板或暗視野聚光器，常用的是拋物面聚光器，使光源的光束被阻擋．不能由下而上地通過標本進入物鏡。從而使光線改變途徑，傾斜地照射在觀察的標本上，標本遇光發(fā)生反射或散射，散射的光線投入物鏡內(nèi)，因而整個視野是黑暗的。在暗視野中所觀察到的是被檢物體的衍射光圖像．并非物體的本身，所以只能看到物體的存在和運動，不能辨清物體的細微結(jié)構(gòu)。但被檢物體為非均質(zhì)時，并大于1／2波長，則各級衍射光線同時進入物鏡，在某種程度上可觀察物體的構(gòu)造。一般暗視野顯微鏡雖看不清物體的細微結(jié)構(gòu)，但卻可分辨0.004um以上的微粒的存在和運動，這是普通顯微鏡(的分辨力為0.2um)所不具有的特性，可用以觀察活細胞的結(jié)構(gòu)和細胞內(nèi)微粒的運動等。

暗視野顯微鏡遮光板的制作：普通顯微鏡只要聚光器是可以拆卸的，支架的口徑適于安裝暗視野聚光器，即可改裝成暗視野顯微鏡。在無暗視野聚光器時，可用厚黑紙片制作一個遮光板，放在普通顯微鏡的聚光器下方的濾光片框上，也能得到暗視野效果。
(1)．將顯微鏡聚光器調(diào)到位置，用低倍鏡對好焦距。
(2)．取下目鏡，從鏡筒中觀察并調(diào)節(jié)光闌的大小，使其與鏡筒中所見物鏡的視野相等。
(3)．用厚黑紙剪制擋光板。外圈直徑與濾光片框架相同，部分的大小與調(diào)節(jié)好的光闌孔徑一樣(可用半透明的小紙片，放在通光孔處聚光鏡鏡面上，紙上顯示的光斑即為光闌的孔徑，再用圓規(guī)量取大小)。
(4)．將擋光板放在濾光片框架上，開大光闌進行樣品觀察。

上海滬杏光學(xué)2015